大鼠海馬神經(jīng)元細胞取自新鮮的組織，按照標準操作流程分離培養(yǎng)，*培養(yǎng)基能提供細胞理想的生長條件，降低雜細胞污染，保證不同批次間細胞質(zhì)量的穩(wěn)定，所提供的原代細胞均需經(jīng)過細胞類型特異性標記物、細胞形態(tài)學(xué)等檢測，保證細胞純度在90%以上；同時也需經(jīng)過微生物檢測，保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類型的細菌。

　　
 

　　海馬椎體神經(jīng)元是海馬區(qū)的主要成分，主要功能是參與近期記憶、情緒及內(nèi)臟功能調(diào)節(jié)、是老年性癡呆等疾病的主要病灶之一。海馬神經(jīng)元細胞培養(yǎng)是研究神經(jīng)細胞生物學(xué)特性和外源干擾因素作用(細胞因子)的有效細胞模型，其在神經(jīng)生物學(xué)，發(fā)育生物學(xué)體外實驗研究中已被廣泛應(yīng)用。大鼠海馬神經(jīng)元細胞采用胰酶消化制備而來，細胞總量約為5×105個/瓶，細胞純度可達80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

　　

　　收到大鼠海馬神經(jīng)元細胞請按照以下方法進行操作。

　　

　　1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

　　

　　2、海馬神經(jīng)元細胞為終末分化的細胞，建議直接使用，不建議擴大培養(yǎng)。

　　

　　3、待細胞狀態(tài)最佳時準備轉(zhuǎn)孔培養(yǎng)，進行實驗：

　　

　?。?）吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次。

　　

　?。?）加入0.125%的胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃消化1min左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化。

　　

　　（3）用吸管輕輕吹打混勻，按適當(dāng)?shù)谋壤M行轉(zhuǎn)孔培養(yǎng)實驗，放入37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

　　

　　（4）待細胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。